17羥孕酮elisa試劑盒是用于定量測(cè)量樣本中17羥孕酮(17-OHP)含量的實(shí)驗(yàn)工具。采用了競(jìng)爭(zhēng)性抑制酶免疫分析技術(shù)或雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附法。在檢測(cè)過程中,特異性抗體與樣本中的17-OHP發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng),通過酶標(biāo)儀測(cè)量反應(yīng)后的顏色深淺來間接反映樣本中17-OHP的濃度。
17羥孕酮ELISA試劑盒的保存需重點(diǎn)關(guān)注溫度控制、避光環(huán)境、密封性、操作規(guī)范及樣本處理,具體方法如下:
一、核心保存條件
溫度控制
短期保存(1周內(nèi)):試劑盒應(yīng)存放在2-8℃的冰箱中(如醫(yī)用冷藏柜),避免溫度波動(dòng)。
長(zhǎng)期保存(超過1周):若需長(zhǎng)期保存,建議分裝后置于-20℃或更低溫度(如-70℃),但需避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸條件:運(yùn)輸時(shí)需使用干冰或生物冰袋維持2-8℃低溫,防止試劑失效。
避光環(huán)境
試劑盒中的顯色劑(如底物A、B)對(duì)光敏感,需避光保存。建議使用原裝避光包裝或存放于不透光的容器中。
密封性
未使用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,并確保密封良好,防止潮濕空氣進(jìn)入導(dǎo)致試劑性能下降。
酶標(biāo)包被板開封后若未用完,需將剩余板條裝入密封袋,并加入干燥劑(如硅膠顆粒)以吸收潮氣。
二、關(guān)鍵操作規(guī)范
使用前平衡溫度
從冷藏環(huán)境中取出試劑盒后,需在室溫(20-25℃)下平衡15-30分鐘,使試劑溫度與室溫一致,避免冷凝水影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
避免反復(fù)凍融
樣本和試劑若需冷凍保存,應(yīng)按一次用量分裝,避免多次解凍導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或活性喪失。
溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可再次冷凍保存。
防止交叉污染
使用一次性吸頭,避免加樣器金屬部分接觸終止液或底物,防止試劑間交叉污染。
不同批號(hào)的試劑不得混用,以免影響實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。
三、樣本保存與處理
血清/血漿樣本
采集后需盡快離心(2000-3000轉(zhuǎn)/分,10-20分鐘),分離上清液。
若無法及時(shí)檢測(cè),可短期保存于2-8℃(1周內(nèi)),長(zhǎng)期保存需分裝后置于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)上清/組織勻漿
細(xì)胞培養(yǎng)上清需離心(1000×g,20分鐘)去除顆粒后保存。
組織勻漿需用預(yù)冷PBS(pH7.4)沖洗,剪碎后加入玻璃勻漿器中冰上研磨,離心后取上清保存。
特殊樣本處理
溶血樣本不宜檢測(cè),因血紅蛋白中的過氧化物活性會(huì)干擾HRP標(biāo)記的ELISA反應(yīng)。
細(xì)菌污染樣本需離心后取上清,避免內(nèi)源性酶(如β-半乳糖苷酶)干擾結(jié)果。
四、試劑盒組件保存細(xì)節(jié)
濃縮洗滌液
若出現(xiàn)結(jié)晶,可于37℃水浴中加熱15分鐘助溶,稀釋后使用(如1:20稀釋)。
稀釋后的洗滌液需在24小時(shí)內(nèi)使用完畢,避免污染。
顯色劑與終止液
顯色劑A易揮發(fā),需避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子;顯色劑B對(duì)光敏感,需避光保存。
終止液(如硫酸)具有腐蝕性,操作時(shí)需佩戴手套,避免接觸皮膚。
五、長(zhǎng)期保存建議
定期檢查:每月檢查試劑盒的有效期和存儲(chǔ)條件,確保試劑未過期且保存環(huán)境符合要求。
記錄管理:建立試劑盒使用臺(tái)賬,記錄保存溫度、開封日期及使用情況,便于追溯和質(zhì)量控制。